ABSTRACT
Foi padronizado um ensaio imunoenzimático do tipo indireto para detecção de imunoglobulina A (ELISA IgA) anti- Campylobacter fetus subp. venerealis em muco cérvico- vaginal bovino utilizando um extrato protéico de Campylobacter fetus subsp. venerealis produzido pelo método de extração ácida pelo tampão de glicina (0,2M; pH2,2). A média dos valores de densidade ótica (DO450) foi de 0,143±0,09. As bandas protéicas dos antígenos de Campylobacter fetus subsp. venerealis e de Campylobacter fetus subsp. fetus melhor reconhecidas pela IgA do muco cérvico- vaginal migraram em 42,6 kDa mas a proteina evidenciada em 93 kDa foi reconhecida exclusivamente pelo Campylobacter fetus subsp. venerealis. Os anticorpos presentes na amostra de muco vaginal testada no immunoblotting que apresentou resultado positivo no ELISA IgA, reconheceu antígenos de C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.
An indirect enzyme-linked immunosorbent assay was developed to detect antigenspecific secretory IgA antibodies to Campylobacter fetus subsp. venerealis in bovine vaginal mucus with a protein extract of the Campylobacter fetus subsp. venerealis by the acid glycine extraction method. Mean optical density measurement (λ=450 nm) was 0.143±0.9. The most immunoreactive protein bands of the Campylobacter fetus subsp. venerealis or Campylobacter fetus subsp. fetus recognized by IgA in immunoblotting, using bovine vaginal mucus samples, migrate at 42.6 kDa. The protein that migrates at 93 kDa was recognized exclusively for C. fetus subsp. venerealis. A positive vaginal mucus sample of a cow from negative herd recognized antigens of C. jejuni subsp. jejuni e C. fetus subsp. fetus.
Subject(s)
Animals , Cattle/classification , Campylobacter fetus/immunology , Immunoglobulins/immunology , Immunoenzyme Techniques/methodsABSTRACT
O vírus da imunodeficiência humana do tipo 1 estabelece uma infecçäo presistente que na maioria dos casos evolui para a Síndrome de Imunodeficiência humana do tipo 1 tem sido geneticamente classificado em maior ou em outros grupos. Ogrupo maior é subdivido em nove subtipos baseados em evidências seqüênciais. A infecçäo pelo vírus da imunodeficiência humana do tipo 1 foi transmitida aos hemofílicos principalmente pelos concentrados de coagulaçäo no final da década de 70 e meados da de 80 e a síndrome da imunodeficiência adquirida tornou-se a principal causa de morbidade e morte entre estes pacientes. O Objetivo deste estudo foi o de determinar os subtipos do vírus da imunodeficiência humana em oito pacientes soropositivos com moléstias hemorrágicas de Belo Horizonte, Brasil, utilizando o ensaio de mobilidade heteroduplex, um método näo seqüêncial, que tem a propriedade de separar os portadores do vírus. Realizamos a reaçäo da cadeia de polimerase seguida pelo ensaio de mobilidade heteroduplex e obtivemos em todos os oito pacientes a confirmaçäo que os mesmos pertenciam ao subtipo B do vírus da imunodeficiência humana que é a mais prevalente nos Estados Unidos, Europa e Brasil. Os pacientes hemofílicos provavelmente foram infectados de concentrados provenientes da Europa, Estados Unidos, Säo Paulo e Rio de Janeiro (Brasil), utilizados em período anterior ao do conhecimento do vírus da imunodeficiência humana adquirida, e do uso de plasmas e concentrados näo testados, ou inativados, para o mesmo. O ensaio da mobilidade de heteroduplex e amplificaçäo do ácido desoxiribonucleico pela reaçäo de cadeia da polimerase provaram ser um modo rápido de subtipar o vírus da imunodeficiência humana adquirida em indivíduos infectados por transfusäo. O teste pode ser útil como rastreamento e detecçäo da origem e procedência do vírus da imunodeficiência adquirida.